［摘要］

目的 探讨富含亮氨酸重复序列的 G 蛋白耦联受体 5( Lgr5) 蛋白激活树突状细胞( DCs) ，诱导产生 CD8 + 细胞毒 T 淋巴细胞( CTL) 进行结肠癌免疫治疗的效果。方法 利用 Lgr5 蛋白诱导 DCs 成熟，同时检测 DCs 表面标记物和白细胞介素( IL) -10 与 IL-12 表达量的变化，随后通过 Lgr5-DC 诱导 Lgr5 抗原特异性 CD8 + CTL，并 检测 Lgr5-DC-CD8 + CTL 对正常结肠上皮细胞 CCD-18Co 和结肠癌细胞 HT29 的作用，同时检测干扰素( IFN) -γ 释 放量。然后进一步检测 Lgr5-DC-CD8 + CTL 对 BALB/C-nu /nu 小鼠结肠癌的抑制情况，并通过组织染色观察治疗后 肿瘤组织的变化。结果 与 PBS 刺激相比，Lgr5 蛋白刺激能够显著上调 DCs 表面标记物 DC80、DC83、DC86 和 HLA-DＲ 水平，依次达到 3. 29、3. 06、2. 90 和 6. 93 倍; 同时 Lgr5 蛋白刺激显著促进 IL-12 的释放和显著减少 IL-10 的分泌( P ＜ 0. 05) 。Lgr5-DC-CD8 + CTL 和 DC-CD8 + CTL 均导致少量 CCD-18Co 细胞杀伤( P ＞ 0. 05) ，而 Lgr5-DC- CD8 + CTL 对 HT29 细胞的杀伤率是 DC-CD8 + CTL 的4. 40 倍( P ＜ 0. 05) 。动物实验表明，BALB/C-nu /nu 结肠癌移 植鼠经 Lgr5-DC-CD8 + CTL 治疗后，肿瘤体积比显著低于 PBS 组和 DC-CD8 + CTL 组，依次达到 0. 25 和 0. 24 倍( P ＜ 0. 05) 。组织染色显示，Lgr5-DC-CD8 + CTL 处理导致明显的肿瘤组织病理学改变，同时 BAX 表达升高。结论 Lgr5 蛋白促进 DCs 成熟并诱导产生 Lgr5 抗原特异性 CD8 + CTL，Lgr5-DC-CD8 + CTL 能够高效的杀伤肿瘤细胞并延 迟肿瘤生长。
［关键词］ 富含壳氨酸重复序列的 G 蛋白耦联受体; 树突状细胞; 细胞毒 T 淋巴细胞; 结肠癌; 免疫治疗; 小鼠

    白细胞介素( IL) -4 ( 0. 5 IU/L) 以及粒细胞- 巨噬 细 胞 集 落 刺 激 因 子 ( granulocyte macrophage colony stimulating factor，GM-CSF) 1 IU/L( 武汉默沙克生物技术有限公司)